Die PCR „Twin Stars“ von JLM-Lifetech unterstützen CAHS bei der Etablierung einer neuen „5-in-1-Multiplex“-Nachweismethode für Schafe und Ziegen
Auf dem Schlachtfeld der Tierseuchenprävention und -bekämpfung ist Zeit das Leben und Präzision der Sieg.Pests des petits ruminants virus (PPRV), und Schafpocken-/Köpfenpockenvirus (SPPV-GTPV) sind fünf wichtige Viruskrankheiten, die die Schaf- und Ziegenzucht stark bedrohen.Schleimhautläsionen, und Hautausschläge) und sind anfällig für gemischte Infektionen, so dass ihre Erkennung durch einmalige Krankheitserregeruntersuchungen sowohl zeitaufwendig als auch kostspielig ist.Solche traditionellen Methoden können den dringenden Bedürfnissen der Zollquarantäne und der groß angelegten epidemiologischen Untersuchung nicht mehr gerecht werden..
Vor kurzem veröffentlichte das von Shi Xiju geleitete Forschungsteam der China Academy of Household Animal Science (CAHS) /Chinese Academy of Customs Science and Technology einen bedeutenden Forschungsdurchbruch in derChinesische Zeitschrift für VeterinärmedizinSie haben erfolgreich eine Multiplex-Echtzeit-Fluoreszenz-RT-PCR-Methode entwickelt, die in der Lage ist, diese fünf wichtigen kleinen Wiederkäuerviren gleichzeitig zu erkennen.Das digitale PCR-System Digital Matrix-5000 von JLM-Lifetech und das quantitative Fluoreszenz-PCR-System QX600 haben sich zu einem "goldenen Duo" zusammengeschlossen.," übernimmt die Schlüsselverantwortung für die "Kalibrierung" bzw. "Erkennung".
In dieser Studie konstruierten die Forscher zunächst rekombinante Plasmide, die die Zielgene der fünf Viren enthielten.," Das Forschungsteam wählte das digitale PCR-System von JLM-Lifetech® Digital Matrix-5000 für eine präzise Quantifizierung.
Wie in den folgenden Abbildungen dargestellt, wurde eine absolute Quantifizierung an den positiven Plasmiden von BTV, FMDV, SBV, PPRV und SPPV-GTPV durchgeführt.Die Tropfengrößen für jedes Zielplasmid zeigten eine ausgezeichnete Trennung zwischen positiven und negativen TropfenDie Konzentration jedes Standard-Referenzmaterials reichte zwischen 2,13 x 103auf 1,02 x 104Kopien/μL, wodurch eine solide Konzentrationsbasis für die anschließende Erstellung der Standardkurve und die Empfindlichkeitsanalyse ermittelt wird.
Mit dem präzisen "Ruler", der durch die digitale PCR von JLM-Lifetech bereitgestellt wurde, nutzte das Forschungsteam dann das quantitative Fluoreszenz-PCR-System von JLM-Lifetech QX600, um den Multiplex-Detektions-Assay zu erstellen..Sie haben erfolgreich die synchronisierte Detektion aller fünf Virusziele innerhalb eines einzigen Reaktionssystems erreicht:
Multi-Channel gleichzeitiger Erwerb:Während der Reaktion sammelte der QX600 erfolgreich Fluoreszenzsignale über mehrere Kanäle, darunter FAM, HEX, ROX, TAMRA, CY5 und CY5.5, um sicherzustellen, dass die Signale der verschiedenen Viren frei von gegenseitiger Interferenz sind und genau identifiziert werden können.
Ausgezeichnete Systemkompatibilität:Im Vergleich zu den Singleplex-Analysen blieb die Verstärkungswirksamkeit (E-Wert) des Multiplex-Systems im idealen Bereich von 90%~100%, und die Korrelationskoeffizienten (R2) waren alle größer als 0.996Dies zeigt die hohe Stabilität des Geräts und die geringe Fehlerquote bei der Multiplex-Erkennung.
Die Kombination der "digitalen PCR-Kalibrierung + QX600-Detektion" von JLM-Lifetech lieferte eine außergewöhnliche Leistung für diesen Forschungsdurchbruch:
100%ige Spezifität:Die etablierte Methode erzeugte Amplifikationssignale nur für die Zielviren und blieb bei sieben weiteren häufig auf Schafe und Ziegen wirkenden Krankheitserregern negativ.
Ultraschwere Empfindlichkeit:Die Detektionsgrenze (LoD) für jedes Ziel war unter 5,31 Kopien/μL. Auch wenn die Viruslast in einer Probe extrem gering ist, kann diese Methode sie empfindlich erfassen.
Perfektes Ergebnis in der klinischen Validierung:Bei der Prüfung von 500 klinischen Proben ergab die Methode erfolgreich positive Proben für PPRV, FMDV und BTV und erreichte eine 100% ige Übereinstimmung mit den Ergebnissen der singleplex qPCR-Methode.
Diese Forschungsergebnisse fanden nicht nur ihren Platz in derChinesische Zeitschrift für VeterinärmedizinEs verdichtet fünf verschiedene Experimente in einen einzigen Lauf, wodurch der Verbrauch von Reagenzien und Verbrauchsmaterialien stark reduziert wird.sowie Arbeitskosten. Dies eignet sich besonders für groß angelegte Untersuchungen in intensiven Landwirtschaftsgebieten wie Nordwestchina und bietet ein leistungsfähiges "intelligentes Auge" für eine schnelle Zollquarantäne in Häfen.Als technischer Unterstützer hinter dieser Forschung, ist zutiefst geehrt.
