JLM-Lifetech의 PCR "트윈 스타"는 CAHS에 양과 염소를 위한 새로운 "5in-1 멀티플렉스" 검출 방법을 구축하는 데 도움을 줍니다.
동물 질병 예방 및 통제의 전장에서 시간은 생명이고 정확도는 승리입니다. 블루 텐고그 바이러스 (BTV), 식두염 바이러스 (FMDV), 슈말렌베르크 바이러스 (SBV),소상류의 해충 바이러스 (PPRV), 그리고 양병 / 염병 바이러스 (SPPV-GTPV) 는 양과 염소 재배 산업을 심각하게 위협하는 다섯 가지 주요 바이러스 질환입니다. 비슷한 임상 증상을 공유하는 (고열과 같은),점막 손상, 피부 발진) 과 복합 감염에 취약하기 때문에 단일 병원체 검사를 통해 검출하는 것은 시간과 비용이 많이 든다.이러한 전통적인 방법은 더 이상 관세 격리 및 대규모 전염병 검사의 긴급한 요구를 충족시킬 수 없습니다..
최근에는 중국 가동 동물 과학 학회 (CAHS) / 중국 관세 과학 기술 학회에서 시 시 주 (Shi Xiju) 가 이끄는 연구팀이중국 수의학 학술지그들은 이 다섯 가지 중요한 소류 바이러스를 동시에 검출할 수 있는 멀티플렉스 실시간 형광 RT-PCR 방법을 성공적으로 개발했습니다.JLM-Lifetech의 디지털 매트릭스-5000 디지털 PCR 시스템과 QX600 양적 형광 PCR 시스템은 "황금 듀오"로 힘을 합쳤습니다.,"는 각각 "정형화"와 "탐지"의 핵심 책임을 수행합니다.
이 연구 에서 연구자 들 은 먼저 다섯 가지 바이러스의 목표 유전자 를 포함 한 재조합 플라스미드 를 구성 하였다.,연구팀은 정확한 수치화를 위해 JLM-Lifetech의 디지털 매트릭스-5000 디지털 PCR 시스템을 선택했습니다.
아래 그림에서 보듯이, BTV, FMDV, SBV, PPRV 및 SPPV-GTPV의 양성 플라스미드에서 절대적인 정량화가 수행되었습니다.각 목표 플라즈미드의 방울 그래프는 양성 및 음성 방울 사이의 훌륭한 분리를 보여주었습니다.각 표준 기준 물질의 농도는 2.13 x 10에서31.02 x 104복사본/μL, 후속 표준 곡선 생성 및 감수성 분석에 대한 고체 농도 기준을 제공합니다.
JLM-Lifetech의 디지털 PCR에 의해 제공되는 정확한 "리러"를 사용하여 연구팀은 JLM-Lifetech QX600 양적 형광 PCR 시스템을 사용하여 멀티플렉스 검출 분석을 설정했습니다..그들은 하나의 반응 시스템 내에서 다섯 개의 바이러스 표적의 동기화된 검출을 성공적으로 달성했습니다.
다채널 동시 인수:반응 중에 QX600은 FAM, HEX, ROX, TAMRA, CY5, CY5 등 여러 채널에서 형광 신호를 성공적으로 수집했습니다.5, 서로 다른 바이러스의 신호가 상호 간섭을 받지 않고 정확하게 식별될 수 있도록 보장합니다.
뛰어난 시스템 호환성:싱글 플렉스 검사와 비교했을 때, 멀티플렉스 시스템의 증폭 효율 (E-값) 은 90%~100%의 이상 범위 내에서 유지되었으며 상관 계수 (R2) 는 모두 0보다 크았습니다.996이것은 도구의 높은 안정성과 멀티플렉스 검출에서 낮은 오류율을 보여줍니다.
JLM-Lifetech의 "디지털 PCR 캘리브레이션 + QX600 검출" 조합은 이번 연구의 획기적인 성과를 거두었습니다.
100% 특이성:확립 된 방법은 대상 바이러스에만 증폭 신호를 생성했으며 양과 염소를 영향을 미치는 다른 7 개의 일반적인 병원균에 대해 부정적인 것으로 남아있었습니다.
초고 감수성:각 표적의 탐지 한계 (LoD) 는 5.31 복사/μL 이하였습니다. 샘플의 바이러스 부하가 극히 낮더라도이 방법은 민감하게 포착 할 수 있습니다.
임상 검증에서 완벽한 점수:500개의 임상 표본을 테스트한 결과, 이 방법은 PPRV, FMDV 및 BTV에 대한 양성 표본을 성공적으로 검출하여 싱글플렉스 qPCR 방법의 결과와 100%의 일관성을 달성했습니다.
이 연구 성과는 핵심 저널에 자리 잡았을 뿐만 아니라중국 수의학 학술지하지만 또한 실질적인 의미도 가지고 있습니다. 5개의 실험을 하나의 실험으로 압축하여그리고 노동 비용이것은 특히 중국 북서부와 같은 집중농업 지역에서 대규모 검사를 위해 적합하며 항구에서의 신속한 관세 격리를위한 강력한 "스마트 아이"를 제공합니다. JLM-Lifetech,이 연구를 뒷받침하는 기술 지원자로서, 깊은 영광입니다.
