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qPCR总“迟到”、dPCR也翻车？可能是PCR抑制剂在搞事

qPCR总“迟到”、dPCR也翻车？可能是PCR抑制剂在搞事

做分子检测的人基本都遇到过这类现象：标准品一切正常，换到土壤、粪便、全血、植物、食品提取液，Cq突然推迟；扩增曲线起得来但荧光偏弱，琼脂糖凝胶却有目的条带； qPCR定量整体偏低，做了标准曲线也不稳；改用dPCR，本以为“数字分型不怕抑制”，结果部分微滴/微孔不亮，绝对拷贝数也偏低。这些问题背后，很大一部分是PCR抑制剂在起作用。Analytical and Bioanalytical Chemistry 这篇综述把 qPCR、dPCR、MPS 的抑制机制系统梳理了一遍：PCR不只是“加Template + Master Mix”这么简单，它同时依赖体外DNA聚合、引物退火、变性复性以...

2026-09-28

HRM-qPCR：从熔解曲线中“读”出基因型

HRM-qPCR：从熔解曲线中“读”出基因型

高分辨率熔解曲线分析（High Resolution Melting, HRM）是对PCR扩增后产物DNA片段熔解曲线的图形特征分析，用于识别核酸序列中的遗传变异，根据微小的序列差异区分不同核酸种类，从而实现突变扫描、基因分型和甲基化分析等。HRM分析是一种非破坏性方法，因此在熔解分析完成后，还可对所关联的扩增子进行后续表征，例如采用凝胶电泳或测序技术。不过，高分辨率熔解检测需要具备优异热稳定性和灵敏度的实时荧光定量PCR检测系统，以及专为HRM设计的软件。 HRM的工作原理：从"染色"到"读色" 其核心原理在于：通过实时监测PCR产物在升温过程中双链DNA解链为单链DNA时荧光信号的变化，来...

2026-09-18

看不见的修饰怎么测？看qPCR如何解锁DNA甲基化

看不见的修饰怎么测？看qPCR如何解锁DNA甲基化

在精准医疗与肿瘤早筛的浪潮中，DNA甲基化作为最经典的表观遗传修饰，正成为疾病诊断的“黄金标志物”。然而，甲基化胞嘧啶（5mC）与未甲基化胞嘧啶（C）在碱基序列上完全一致，实时荧光定量PCR（qPCR）是如何跨越这一鸿沟，实现对基因甲基化的精准定量的？本文将为您拆解qPCR在甲基化检测中的核心技术逻辑。核心前置：将“修饰差异”转化为“序列差异” qPCR本身无法直接识别甲基化修饰，其破局的关键在于前处理步骤——亚硫酸氢盐转化（Bisulfite Conversion）。在特定的化学处理下，DNA样本中未甲基化的胞嘧啶（C）会发生脱氨基反应，转化为尿嘧啶（U），在后续PCR扩增中被聚合酶识别...

2026-09-15

文献分享|川农大团队发文《Nature》，揭示水稻高温下质膜快速自我保护新机制

文献分享|川农大团队发文《Nature》，揭示水稻高温下质膜快速自我保护新机制

近日，在国际顶级学术期刊《Nature》上，四川农业大学钦鹏教授、李仕贵教授团队联合中国科学技术大学向成斌教授、孙林峰教授团队发表了一项研究成果，揭示了水稻在高温时快速保护细胞膜稳定性的新机制，并挖掘到稀有耐热单倍型Hap7，为作物耐热育种提供了新思路与基因资源。原文链接：https://www.nature.com/articles/s41586-026-10726-x 研究核心内容水稻细胞膜的"高温就地加固" 高温胁迫会引起细胞质膜过度流体化（hyperfluidization），传统观点认为植物通过转录重编程改变膜脂组成来应对，但耗时较长。本研究发现：在水稻质膜上，有一个...

2026-07-07

文献分享|FCS荧光相关光谱单分子分析技术在开发新型血浆分离技术中的应用

文献分享|FCS荧光相关光谱单分子分析技术在开发新型血浆分离技术中的应用

01研究速览在临床检验与即时检测领域，如何从全血中快速分离出血浆，始终是一个关键挑战。传统的离心法虽然高效，但在便携性、微量样本处理以及缺乏电力供应的场景下，显得力不从心。为解决这一痛点，中国科学院深圳先进技术研究院杨慧团队在《Microsystems & Nanoengineering》上发表了一项创新研究，提出了一种基于负磁泳原理的无电源血浆分离装置。该装置的核心创新在于采用了“长短交替双Halbach增强型磁体阵列”。这一设计能够在无需任何外部电源或精密泵的情况下，利用磁场力在全血中实现血细胞与血浆的高效静态分离。研究团队通过大鼠和人全血样本的实验验证了该装置的分离效果，并将其成功...

2026-06-22

文献分享|杰莱美PCR“双子星”助力海科中心建立羊病“五联检”新方法

文献分享|杰莱美PCR“双子星”助力海科中心建立羊病“五联检”新方法

在动物疫病防控的战场上，时间就是生命，精准就是胜利。蓝舌病病毒（BTV）、口蹄疫病毒（FMDV）、施马伦贝格病毒（SBV）、小反刍兽疫病毒（PPRV）以及绵羊痘/山羊痘病毒（SPPV GTPV），是严重危害养羊产业的五大病毒性疫病。它们临床表现相似（高热、黏膜损伤、皮疹），且易发生混合感染，仅靠单一病原检测耗时长、成本高，已无法满足口岸检疫和大规模流行病学筛查的需求。近日，中国海关科学技术研究中心史喜菊研究团队在《中国兽医科学》发表重磅研究成果，成功建立了一种可同步检测五种羊重要病毒的多重荧光RT-PCR检测方法。在该研究中，杰莱美科技的Digital Matrix-5000数字PCR系统...

2026-06-04

DNA甲基化如何为作物“书写”抗逆未来

DNA甲基化如何为作物“书写”抗逆未来

在植物的生命历程中，每一天都是一场与环境的无声对话。当烈日炙烤、干旱蔓延、病虫害侵袭时，作为固着生物的植物无法像动物那样逃离，它们必须学会“记住”每一次挑战，并调整自身以应对未来的危机。这一切的奥秘，很大程度上藏在一种看不见的化学修饰中——DNA甲基化。什么是DNA甲基化？一种不改变基因序列的“记忆密码”？ DNA甲基化，简单来说，就是在DNA分子的胞嘧啶（C）或腺嘌呤（A）上添加一个甲基基团（-CH3）的化学修饰。这个过程不改变DNA的序列本身，却能深刻影响基因的“开关”状态。想象一下，你的基因组是一本厚重的“生命之书”，而DNA甲基化就像是用荧光笔在这本书上做的标记。有些标记会遮住某些...

2026-05-27

文献分享|杰莱美实时荧光定量PCR和自动考种仪助力川农大团队发文《Nature》，揭示水稻抗病新机制

文献分享|杰莱美实时荧光定量PCR和自动考种仪助力川农大团队发文《Nature》，揭示水稻抗病新机制

近日，在国际学术期刊《Nature》上，由四川农业大学陈学伟教授领衔的研究团队发表了一项突破性的研究成果，首次揭示了病原菌与水稻之间，通过长链非编码RNA（lncRNA）介导的跨界“分子谍战”新机制。这项题为“A pathogen lncRNA secreted into rice sequesters a host miRNA for virulence”的研究，为作物的广谱抗病育种与病害绿色防控提供了新策略。期刊：《Nature》研究团队：四川农业大学陈学伟团队原文链接：https://www.nature.com/articles/s41586-026-10572-x 研究核心内容...

2026-05-22

为何选择数字PCR进行拷贝数变异分析？

为何选择数字PCR进行拷贝数变异分析？

目前已有多种拷贝数变异（CNV）分析的传统方法，包括荧光原位杂交（FISH）、流式细胞术、微阵列分析以及新一代测序（NGS）。然而这些方法均存在相应局限：例如FISH和流式细胞术相比dPCR提供的可量化结果有限，可能导致微小的拷贝数变异被遗漏；NGS分析则因工作流程复杂、成本高昂且易受串联重复序列（许多CNV的典型特征）干扰而受限。基于qPCR的方法同样是检测CNV的有效工具，但这类方法需通过标准曲线进行计算，且检测灵敏度通常仅能识别约2倍以上的差异。相比之下，dPCR无需标准曲线即可实现真实的绝对定量分析，灵敏度足以检测低至10%的差异。这种高灵敏度对疾病认知至关重要，以乳腺癌HER2基因...

2026-03-24

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