文献分享|杰莱美PCR“双子星”助力海科中心建立羊病“五联检”新方法
在动物疫病防控的战场上，时间就是生命，精准就是胜利。蓝舌病病毒（BTV）、口蹄疫病毒（FMDV）、施马伦贝格病毒（SBV）、小反刍兽疫病毒（PPRV）以及绵羊痘/山羊痘病毒（SPPV GTPV），是严重危害养羊产业的五大病毒性疫病。它们临床表现相似（高热、黏膜损伤、皮疹），且易发生混合感染，仅靠单一病原检测耗时长、成本高，已无法满足口岸检疫和大规模流行病学筛查的需求。
近日，中国海关科学技术研究中心史喜菊研究团队在《中国兽医科学》发表重磅研究成果，成功建立了一种可同步检测五种羊重要病毒的多重荧光RT-PCR检测方法。在该研究中，杰莱美科技的Digital Matrix-5000数字PCR系统与QX600荧光定量PCR系统组成“黄金搭档”，分别承担了关键的“定标”与“检测”重任。
在本研究中，科研人员首先构建了5种病毒靶基因的重组质粒。为了确定这些“标准物质”到底含有多少拷贝数，研究团队选用了杰莱美的Digital Matrix-5000数字PCR系统进行精确定值。
如下图所示，对BTV、FMDV、SBV、PPRV及SPPV-GTPV的阳性质粒进行绝对定量，各靶标质粒的微滴图显示出良好的阳性/阴性分离度，各标准品的浓度范围为2.13×103～1.02×104 copies/μL，为后续标准曲线的绘制及灵敏度分析提供了浓度依据。
有了杰莱美数字PCR提供的精准“标尺”，研究团队随后利用杰莱美QX600荧光定量PCR系统建立了多重检测体系，成功实现了在同一反应体系中同步检测5种病毒靶标：
- 多通道同步采集：QX600在反应中成功采集了FAM、HEX、ROX、TAMRA、CY5、CY5.5等多个通道的荧光信号，确保了不同病毒信号的互不干扰和精准识别。
- 体系兼容性优异：与单重检测相比，多重体系的扩增效率（E值）保持在90%-100%的理想范围内，相关系数（R²）均大于0.996，证明了仪器在多重检测中的高稳定性和低误差率。
杰莱美“数字PCR定标 + QX600检测”的组合拳，成就了这项研究成果的卓越性能：
- 特异性100%：建立的方法仅对目标病毒有扩增信号，对其他7种常见羊病病原均为阴性。
- 灵敏度极高：各靶标最低检测限均达到5.31 copies/μL以下，即使样本中病毒含量极低，也能被这套方法敏锐捕捉。
- 临床验证满分：在对500份临床样品的检测中，该方法成功检出PPRV、FMDV和BTV阳性样本，且结果与单重qPCR方法100%符合。
这项研究成果不仅发表在核心期刊《中国兽医科学》上，更具有极高的现实意义。它将原本需要做五次的实验简化为一次，大大降低了试剂耗材消耗和人工成本，特别适合中国西北等养殖密集区的大规模筛查，也为海关口岸的快速检疫提供了强有力的“智慧之眼”。杰莱美科技作为该研究背后的技术支持者，深感荣幸。
