免ROX校准|从光学原理看杰莱美qPCR免校准的真正价值
使用qPCR的同学对ROX应该都不陌生,但"我的仪器到底要不要加ROX"这个问题,几乎每个人都纠结过。换了一台新仪器,扩增曲线突然变成“异型";用了含ROX的预混液却忘了开ROX通道;或者反过来——开了ROX通道但试剂里根本没加ROX,结果被软件用"不存在的染料"做了错误归一化…… 这些坑的背后,其实藏着一个核心问题:qPCR仪器是否需要ROX校准?为什么有些qPCR显示ΔRn,有些qPCR使用RFU?其实从根本上讲,是由qPCR仪的光学系统架构决定的。 ROX到底是什么,有什么作用? ROX是一种惰性荧光染料,加到qPCR预混液里后,它不参与PCR反应,荧光信号在整个扩增过程中保持稳定,与模...
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